Full Text

Лекарственные средства по истечении срока годности оказываются в категории фармацевтических отходов, которые опасны для окружающей природной среды. Регламентированные методы их уничтожения не являются экологически безопасными и требуют существенной доработки. В связи с этим ИЭГМ разрабатывается новый метод утилизации лекарственных средств с помощью актинобактерий рода Rhodoccocus - биологическая деструкция. Данный метод является экологически безопасным как для окружающей среды, так и для человека. В настоящее время процесс исследуется в лабораторных условиях. В колбы с культуральной жидкостью помещаются колонии актинобактрий и лекарственное средство; жидкость в колбах перемешивается в шейкере, в результате чего актинобактериям механическим путем подается питательная среда [1, 2]. Процесс биологической деструкции, в частности дротаверина гидрохлорида, зависит от ряда параметров (температура, интенсивность перемешивания, условия формирования колоний актинобактерий и т.д.). Для дальнейшего использования данного метода необходима его валидация (аттестация) как в лабораторных исследованиях, так и для промышленной реализации. Одним из критериев валидации является повторяемость реализаций. Внутреннее содержание этого процесса начинает интересовать при переходе к промышленному биореактору, в котором наблюдается неравномерность интенсивности перемешивания. Из-за равномерности параметров процесса по объему культуральной жидкости в колбе в лабораторных условиях достаточна оценка повторяемости по времени окончания процесса, критерием которого является предельная концентрация дротаверина гидрохлорида. Реализации при одинаковых условиях отличаются друг от друга, из-за чего повторяемость биологической деструкции можно считать случайным процессом. В результате для валидации по повторяемости необходимо решить следующую задачу: определить область течения процесса с вероятностью 95 % хотя бы в трех реализациях, исходя из требований фармации. По этой причине и из-за дороговизны получения и анализа проб данный случайный процесс исследуется с применением микростатистики [3]. Подобный анализ при гипотезе о нормальном законе распределения параметров кинетического уравнения и стационарности простых процессов был рассмотрен в работе по усталостной прочности [4]. 1. Повторяемость биологической деструкции как случайный процесс К случайному характеру биологическую деструкцию приводят неизвестные неконтролируемые параметры, которые хотелось бы формализовать как некоторые случайные величины. Для решения поставленной задачи необходим выбор достоверного закона распределения. Для этого можно воспользоваться тем фактом, что данный процесс относится к классу кинетически моделируемых простых случайных процессов [5]. Реализации описываются кинетическим уравнением первого порядка, которое позволяет нивелировать недостатки выборки по повторяемости биологической деструкции [1, 6]: (1) где x - концентрация дротаверина гидрохлорида; k = b+at - «константа реакции». Из выражения (1) следует, что концентрация является функцией времени t и параметров a и b, которые при анализе повторяемости представляют собой систему случайных величин, а сам случайный процесс сводится к функции этой системы. В таблице приведены результаты биологической деструкции дротаверина гидрохлорида в эксперименте на повторяемость в 10 реализациях для рационального варианта контролируемых параметров, разработанного в ИЭГМ. Экспериментальные данные по концентрации (x, %) дротаверина гидрохлорида рационального параметра процесса биологической деструкции Номер реализации Время t, сут 0 5 10 1 100 39,46 8,24 2 100 43,14 5,49 3 100 35,82 9,89 4 100 40,21 10,99 5 100 42,53 3,30 6 100 58,51 11,54 7 100 33,25 10,44 8 100 21,39 1,10 9 100 64,18 5,49 10 100 50,26 1,00 Для каждой реализации были определены параметры «константы реакции» a и b и с применением микростатистики [7] для рационального варианта процесса были установлены выборочные аналоги математического ожидания ma, mb, дисперсии Da, Db и стандартного квадратичного отклонения ?a, ?b, а также корреляционная связь между случайными величинами из системы Kab = 0. Для определения области течения процесса с заданной вероятностью необходима информация о законе распределения, для выбора которого построим гистограммы случайных величин a и b из имеющейся выборки. Для этого разделим диапазон случайных величин на интервалы и приближенно построим статистическую функцию [7] (2) где p*i - частота; mi - количество значений в интервале; k - число интервалов, k = 3; n - общее количество экспериментальных значений, n = 10 (рис. 1, кривая 2). Рис. 1. Гистограммы случайных величин b и a: 1 - логнормальный закон распределения; 2 - статистическая функция; 3 - нормальный закон распределения В условиях микростатистики законы распределения случайных величин, полученные по гистограммам, являются ориентировочными, поэтому для сравнительного анализа в условиях данного эксперимента были построены кривые для нормального (рис. 1, кривая 3) и логнормального (рис. 1, кривая 1) законов распределения. Все кривые для случайных величин a и b близки друг к другу. Единственное, что следует отметить: для нормального закона распределения задействованы отрицательные значения параметров a и b, что означает рост концентрации с некоторого момента времени. В результате традиционный подход для выбора закона распределения в данном случае является малодостоверным. Поэтому для выбора достоверного закона распределения и решения поставленной задачи на основе кинетического моделирования использовали несколько приближенных подходов анализа функции системы случайных величин, а именно: линеаризацию, гипотезы о нормальном и логнормальном законах распределениях [8]. Применение линеаризации позволило определить математическое ожидание и дисперсию случайного процесса, однако из-за отсутствия закона распределения невозможен корреляционный анализ. Нормальный закон распределения позволил получить аналитические зависимости основных характеристик и провести корреляционный анализ как для определяющего параметра процесса, так и для его интенсивности, но необходимо выполнять ограничения на дисперсии [2]. Логнормальный закон распределении также позволяет произвести корреляционный анализ, однако все результаты возможно получить численным интегрированием, поэтому выражения для математического ожидания (3), дисперсии (4) и корреляционной функции (5) были найдены с помощью программы Matlab: (3) (4) (5) где , , , - параметры, которые определяются через математические ожидания случайных величин ma, mb и средние квадратичные отклонения ?a, ?b. 2. Дисперсия случайного процесса - критерий выбора достоверного закона распределения системы случайных величин Основным является вопрос о достоверности гипотезы распределения системы случайных величин, так как этот закон является определяющим. В условиях микростатистики произвели выбор критерия для определения достоверного закона распределения системы случайных величин на основе анализа сходимости основных числовых характеристик случайного процесса: математического ожидания mх(t) и дисперсии Dх(t). При уменьшении дисперсий случайных величин в рассматриваемых подходах наблюдается тенденция сходимости результатов по математическому ожиданию и дисперсии случайного процесса. При этом скорость сходимости кривых для математического ожидания значительно выше, чем кривых для дисперсий, поэтому в качестве критерия достоверного закона распределения системы случайных величин была выбрана дисперсия случайного процесса Dх(t) - как наиболее чувствительная к исходным дисперсиям и характеристика. В данном случае для функции системы должны выполняться ограничения на дисперсии случайных величин из системы [2]. Например, уменьшение дисперсий в 2 раза дает лучшую сходимость дисперсий процесса при нормальном и логнормальном законах распределения и линеаризации (рис. 2) по сравнению с результатами при реальных дисперсиях системы случайных величин (рис. 3). Дисперсии процесса близки в начале, однако значительно различаются в период со 2 до 15 сут. Более жесткие ограничения на дисперсии и улучшают сходимость результатов по дисперсиям процесса, однако существует проблема выбора достоверного приближенного метода анализа данного процесса при реальных дисперсиях системы случайных величин. Этот вопрос решается в каждом конкретном случае индивидуально. Рис. 2. Дисперсия процесса при дисперсиях системы случайных величин Da /2 и Db/2: 1 - нормальный закон распределения; 2 - линеаризация; 3 - логнормальный закон распределения Рис. 3. Дисперсия процесса биологической деструкции дротаверина гидрохлорида: 1 - нормальный закон распределения; 2 - линеаризация; 3 - логнормальный закон распределения; ? - по данным эксперимента Введенный критерий - дисперсию случайного процесса Dx(t) - применили для выбора достоверного закона распределения системы случайных величин. Для этого представили случайный процесс как систему случайных величин, полученных в сечениях процесса по времени, для которых по экспериментальным данным (см. таблицу) нашли дисперсии в соответствующие моменты времени с применением микростатистики [5] (см. рис. 3). Из рис. 3 следует, что дисперсия процесса по данным эксперимента близка к дисперсии, определенной с применением гипотезы о логнормальном законе распределения, поэтому его можно использовать для анализа случайного процесса биологической деструкции дротаверина гидрохлорида (см. таблицу). Для процесса биологической деструкции дротаверина гидрохлорида с применением логнормального закона распределения можно построить области реализаций с заданной вероятностью 95 %. Выражение для вероятности имеет вид (6) где плотность распределения двух независимых величин (Kab = 0) находится как . Параметр ? в пределах интегрирования был найден путем половинного деления и при вероятности 95 % составил 1,15. Область реализаций с заданной вероятностью 95 % представлена на рис. 4, а плотность распределения в соответствующих пределах - на рис. 5. Рис. 4. Область реализаций процесса с вероятностью 95 %, ограниченная кривыми: 1 - mx(t); 2 - mx(t) - 1,15 ?x(t); 3 - mx(t) + 1,15 ?x(t) Рис. 5. Плотность распределения системы случайных величин a и b, соответствующая вероятности 95 % Область реализаций для процесса биологической деструкции с заданной вероятностью 95 % ограничена кривыми mx(t) - ? ?x(t) и mx(t) + + ? ?x(t) при ? = 1,15, а также предельной концентрацией xпр = 1 %, которая определяет время окончания процесса tпр ? 16 сут. По найденному параметру ? координатами a1 = ma - ? ?a, a2 = ma + ? ?a, b1 = mb - ? ?b, b2 = mb + ? ?b можно выделить прямоугольник, попадание в который a и b имеет вероятность 95 % (см. рис. 5). Выводы 1. В качестве критерия выбора достоверного закона распределения системы случайных величин в условиях микростатистики предложена дисперсия случайного процесса, как наиболее чувствительная к значениям дисперсий из системы. 2. Рассмотренный процесс биологической деструкции дротаверина гидрохлорида достаточно адекватно характеризуется логнормальным законом распределения системы случайных величин, являющихся параметрами кинетических уравнений для реализаций. 3. Для валидации повторяемости рационального варианта процесса определены области реализаций с вероятностью 95 % исходя из требований фармации.

About the authors

A. A. Baranova

Perm National Research Polytechnic University

References

Statistics

Views

Abstract - 36

PDF (Russian) - 23

Refbacks

• There are currently no refbacks.